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蛋白實(shí)驗(yàn)檢測的時候無信號原因及解決方案

更新時間:2022-09-08 00:00:00       點(diǎn)擊次數(shù):4848

  蛋白實(shí)驗(yàn)檢測的實(shí)驗(yàn)有很多種,WB實(shí)驗(yàn)和ELISA實(shí)驗(yàn)是比較常用的兩種實(shí)驗(yàn)方法,蛋白質(zhì)測定是指通過物理或化學(xué)方法對蛋白質(zhì)含量進(jìn)行測定。蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ),是有機(jī)大分子,是構(gòu)成細(xì)胞的基本有機(jī)物,是生命活動的主要承擔(dān)者。沒有蛋白質(zhì)就沒有生命。氨基酸是蛋白質(zhì)的基本組成單位。它是與生命及與各種形式的生命活動緊密聯(lián)系在一起的物質(zhì)。機(jī)體中的每一個細(xì)胞和所有重要組成部分都有蛋白質(zhì)參與。

  檢測方法

  分別向甲、乙兩支試管加入3毫升蛋清稀釋液和清水,再依次向兩支試管中加入雙縮脲試劑A液和B液。觀察甲、乙兩試管中溶液發(fā)生的顏色變化。雙縮脲試劑與蛋白質(zhì)呈現(xiàn)紫色反應(yīng)。

  蛋白實(shí)驗(yàn)檢測的時候無信號原因及解決方案

  1.用于檢測的二抗不匹配。解決辦法:需要確定一抗的宿主。

  2.一抗二抗的濃度過低:需要耐心地重新實(shí)驗(yàn)。

  3.一抗使用次數(shù)過多:億康如果過度稀釋對信號檢測也會有一定的影響,所以盡量使用新稀釋的一抗。

  4.一抗不識別被檢測物種中的蛋白質(zhì):可以再檢查以下一抗的特異性。

  5.一抗或二抗的孵育時間太短:可適當(dāng)延長孵化時間。

  6.凝膠上上樣的蛋白量太少:凝膠上樣品過少也會導(dǎo)致信號弱,所以適當(dāng)增加樣本量也可以防止此現(xiàn)象發(fā)生。

  7.檢測試劑盒不起作用:這種情況出現(xiàn)的較少,實(shí)驗(yàn)中注意試劑盒的有效期是否正常,也可使用陽性對照并確保檢測試劑盒正常工作。

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