15221734409
相關文章
Related Articles詳細介紹
常用啟動子：
αMHC（Myh6）：成年心肌細胞特異性表達（胚胎期低表達）。
cTnT（Tnnt2）：胚胎期和成年期均高表達。
Nppa（ANF）：心力衰竭時激活，可用于病理模型。
過表達模型：將目標基因與心臟啟動子連接（如AAV9載體或轉基因小鼠）。
條件性敲除（cKO）：需結合Cre-loxP系統（如αMHC-Cre × floxed基因小鼠）。
條件性激活（如GOI）：利用Tet-on/off系統或Cre依賴的激活工具。
克隆心臟啟動子（如αMHC 5.5 kb片段）。
插入目標基因（或sgRNA用于CRISPR編輯）。
添加報告基因（如GFP或LacZ）便于表型驗證。
轉基因小鼠：顯微注射載體至受精卵原核。
基因敲除/敲入：CRISPR-Cas9或ES細胞打靶。
條件性模型：需先獲得floxed小鼠（loxP位點 flanking 目標基因），再與心臟特異性Cre小鼠交配。
基因型鑒定：PCR或測序確認目標基因整合。
表達驗證：qRT-PCR/Western blot檢測心臟特異性表達。
功能評估：超聲心動圖（Echo）、心電圖（ECG）、組織病理學（如Masson染色檢測纖維化）。
解決：驗證啟動子特異性（如分離肝、腦、骨骼肌組織排除泄漏表達）。
優化：使用更嚴格的啟動子（如cTnT比αMHC胚胎期表達更強）。
αMHC-Cre：高表達可能導致心肌肥厚（需選擇低表達品系，如MerCreMer）。
誘導型Cre（如他莫昔芬誘導的Cre-ERT2）可避免發育期影響。
解決：維持遺傳背景一致（如回交至C57BL/6J 10代以上）。
cPM過表達模型：
目標：研究心肌肥厚（如過表達calcineurin）。
方法：αMHC啟動子驅動calcineurin轉基因小鼠。
cPM敲除模型：
目標：研究心臟代謝（如PPARα敲除）。
方法：αMHC-Cre × PPARα-floxed小鼠。
倫理審批：確保實驗符合動物福利規范（如3R原則）。
對照設計：同窩野生型（WT）和雜合子（HET）對照。
表型分析時間點：根據目標疾病（如心力衰竭模型需長期隨訪）。
產品咨詢
歡迎來到
